编者按：肝细胞癌（HCC）是最常见的癌症之一，具有较高的发病率和死亡率[1]。许多患者被诊断为晚期，无法手术治疗。新兴的免疫治疗彻底改变了实体肿瘤的治疗方案[2]。近年来，免疫检查点抑制剂改善了HCC患者的预后[3,4]。嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗是一种新的免疫治疗方法，它使自体T细胞表达合成受体特异性识别肿瘤表面相关抗原，从而发挥抗肿瘤作用[5]。CAR-T细胞治疗在血液系统恶性肿瘤中取得了显著的疗效[6]。然而，CAR-T细胞在实体肿瘤中的应用一直是一个巨大的挑战。Glypican-3（GPC3）是一种具有良好特征的肝细胞癌（HCC）相关抗原，是HCC治疗的一个有希望的靶点[7]。runt相关转录因子3（RUNX3）可以通过调节一系列免疫相关的趋化因子来触发CD8+T细胞在肿瘤微环境中浸润[8]。2023年8月30日《eClinicalMedicine》在线发表了一项研究显示，共表达GPC3和RUNX3 CAR-T细胞治疗在HCC患者中表现出可控的安全性和有希望的抗肿瘤活性。现介绍此项研究，以飨读者。
本研究于2019年8月至2020年12月纳入大量预处理的GPC3阳性HCC患者（NCT03980288）。患者接受250×106细胞剂量的共表达GPC3和RUNX3 CAR-T细胞（CT017 CAR-T细胞）治疗。主要目的是评估其安全性和耐受性。
结果
共6例患者接受CT017 CAR-T细胞治疗，中位年龄为50.5岁（范围36～66岁），均为男性。所有患者均为BCLC C期和存在肝外转移病灶。6例患者共接受7次治疗（其中1例患者接受了2次治疗），剂量为250×106细胞。3例患者接受CT017单药治疗，3例患者首次治疗时接受CT017-酪氨酸激酶抑制剂（TKI）联合治疗。1例患者在CT017单药治疗后第二次输注CT017-TKI联合治疗。
所有患者都经历了细胞因子释放综合征（CRS），50%（3/6）为2级，50%（3/6）为3级，经治疗后均得到改善。未观察到免疫效应细胞相关的神经毒性综合征。由于研究者出于安全考虑，没有进行剂量递增试验。在6例可评估的患者中，1例获得部分缓解（图1），2例疾病稳定，客观缓解率为16.7%，疾病控制率为50%，AFP水平的变化可以代表CAR-T细胞治疗的疗效，治疗反应者表现出AFP水平下降，无反应者表现出AFP水平稳定或增加（图2）。中位随访时间为7.87个月，中位疾病控制时间为3.2个月，中位无进展生存期为3.5个月，中位总生存期为7.9个月，4例患者采用联合治疗，联合治疗的持续时间可能与OS相关（图3）。CT017治疗后最长OS为18.2个月。
图1. PR患者靶病变的影像学评估（引自eClinicalMedicine）
图2. CT017 CAR-GPC3 T细胞治疗后HCC患者的临床反应。（a）PFS游泳图（mITT分析集）；（b）肿瘤大小随基线变化的蜘蛛图；（c）最佳总体反应与AFP向基线变化之间的关系。缩写：ADA 抗药物抗体；AFP 甲胎蛋白；CAR T 嵌合抗原受体T细胞；mITT 改良的治疗意向分析；PD 进展性疾病；PR 部分反应；SD 疾病稳定（引自eClinicalMedicine）
图3. 联合治疗持续时间与OS的散点图（引自eClinicalMedicine）
讨论与结论
这是靶向GPC3的第四代CAR-T细胞的首次人体临床试验。所有患者均发生CRS，其中50%为3级CRS。所有患者的CRS事件在治疗当日迅速开始。与之前的Y035 CAR-GPC3 T细胞治疗试验[9]数据相比，本次试验患者的CAR+。细胞治疗剂量较低（250×106 vs. （700～9250）×106个细胞），但CRS发生率较高（100% vs. 69.2%），表明该产品可能毒性稍高。但没有发生4级或5级CRS，没有患者需要住进重症监护室，所有患者经治疗后均从CRS中恢复，未发现DLT，表明该疗法对晚期HCC患者通常是安全性可控。
值得注意的是，一例患者接受了两次输注，提示重复输注的可行性。在联合治疗的4例患者中，没有发现CRS发生率和严重程度增加，2例患者（50.0%）发生3级CRS，与接受CT017单药治疗的患者相同（2例患者中有1例发生3级CRS）。研究结果显示CT017在单药治疗和联合TKI治疗中显示出可控的安全性。
在本研究中，联合组观察到1例PR，单药组未发现PR，提示瑞戈非尼的加入可能会增强CT017 CAR-GPC3 T细胞的疗效。6例患者中有4例先前接受过抗PD-1或PD-L1免疫治疗。在接受过免疫治疗的患者中，两例患者在CT017 CAR-GPC3 T细胞治疗后达到SD，一例患者达到PR，而在未接受过免疫治疗的患者中，没有患者从CT017治疗中获益。基于这些数据，先前使用免疫治疗的患者可能从CT017 CAR-GPC3 T细胞治疗中获得更大的益处。这些发现需要在未来的研究中进一步验证。
这应该是首个研究共表达RUNX3的CAR-T细胞在患者体内的安全性和疗效的临床试验。该研究观察到高频率的CRS合并IL-6升高和长时间的CAR-T细胞。然而，由于CAR-T细胞治疗后没有进行肝脏活检，因此对肿瘤微环境中CAR-T细胞浸润情况仍然未知。
该试验存在局限性。第一，样本量小；第二，患者存在异质性，包括病理分级不同，既往治疗情况不同等。
总之，此项研究显示，CT017对晚期HCC患者具有可控的安全性和有希望的抗肿瘤活性。需要进一步验证。
参考文献
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