编者按：在胃肠道癌症研究领域，我们欣喜地看到循环肿瘤DNA（ctDNA）的潜力数据持续涌现，当前这一领域已成为科研和医学界的热议焦点。2024年美国临床肿瘤会（ASCO）年会口头摘要中有关ctDNA的内容也不在少数。其中，摘要3513尤为引人注目。研究者利用一种创新且高度灵敏的HPV ctDNA检测技术，深入探讨了接受放化疗的局部肛门癌患者的HPV ctDNA状态与临床结果之间的关系。鉴于HPV感染与超过90%的肛门癌病例直接相关，这项研究的重要性不言而喻。2024年5月25日，Atrium Health的Levine癌症研究所的Mohamed Salem博士在ASCO每日新闻中对这一研究进行了深入点评，为我们揭示了其背后的意义和价值。

Mohamed Salem博士   

研究简介

背景

肛门癌在美国的发病率持续上升，已有充分研究证实，超过90%的肛门癌病例与HPV感染密切相关。当前，针对局部肛门癌的标准治疗手段为同步放化疗（cRT）。尽管在其他实体瘤中，术后数周内ctDNA水平与复发风险存在关联，但针对HPV相关的肛门生殖器癌症，在cRT治疗后，尚无法明确ctDNA作为预后生物标志物的最佳检测时间点。因此，本研究采用了一种新型、高灵敏度的HPV ctDNA检测方法，旨在评估接受cRT治疗的局部肛门癌患者临床结果与HPV ctDNA存在状态之间的关联。

方法

根据IRB（机构审查委员会）批准的协议，研究者从在本院接受cRT治疗的Ⅰ~Ⅲ期肛门癌患者身上，在治疗前、治疗结束时（第5周）以及治疗后第3、6、9和12个月，分别分离出ctDNA。采用微滴式数字PCR检测HPV ctDNA，对13种致癌型HPV的E6和E7致癌基因进行评估，以量化HPV ctDNA。设定HPV ctDNA检测限为16 HPV拷贝 /ml。通过Kaplan-Meier方法估算HPV ctDNA状态与中位RFS的关系，并使用对数秩检验进行比较。采用卡方检验评估选定临床因素与复发之间的关系，以单侧P<0.05为显著性水平。

结果

在接受cRT后，第5周和治疗后第3、6、12个月，分别在9/41（22%）、4/30（13%）、2/20（10%）和0/12（0%）的患者中检测到HPV ctDNA。与HPV ctDNA阴性状态相比，cRT后3个月检测到HPV ctDNA与临床复发（100% vs. 8%，OR 88，95%CI：4~2000，P=0.006）和较差的RFS（5.9个月 vs. 未达到，HR 24，95%CI：1.2~475，P<0.001）相关。
在第5周治疗结束时，根据HPV ctDNA状态观察到的RFS差异并不显著（两者中位RFS均未达到，HR 2.4，95%CI：5~10，P=0.15）。
在治疗后第3个月，HPV ctDNA检测对复发的敏感性和特异性分别为57%和100%，阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）分别为100%和89%。基线临床分期、T分期、N分期、年龄和性别与cRT后的临床复发无关（所有P>0.25）。

结论

通过这种新型且高度灵敏的检测方法，研究发现在cRT（化学放射治疗）后3个月检测到的HPV ctDNA与RFS之间存在显著相关性。此外，在这项回顾性系列研究中，HPV ctDNA的阳性状态在预测cRT后肛门癌复发方面展现出了比基线临床特征更为优越的预测能力。因此，未来的临床试验应当考虑纳入治疗后3个月的时间点作为评估节点，以便基于HPV ctDNA的状态来精准识别HPV阳性肛门癌患者中复发风险较高的个体。我们机构即将启动一项临床试验，旨在评估抗PD-L1与抗TIGIT免疫疗法在cRT后HPV ctDNA呈阳性的HPV相关癌症患者中的疗效。

专家点评

Mohamed Salem博士：在精准医学和精准肿瘤学蓬勃发展的当下，我们一直致力于最大化治疗效果并最小化治疗不良反应，为此，我们不断开发新的生物标志物。MD安德森癌症中心的Morris博士所领导的这项研究正是我认为非常引人入胜的一项。他致力于探索不同时间点ctDNA的关联性，并探寻其与疾病复发的潜在联系。鉴于HPV感染与超过90%的肛门癌密切相关，且肛门癌在美国发病率逐年上升，这项研究显得尤为关键。
该研究的设计匠心独运，它纳入了接受根治性放化疗的Ⅰ~Ⅲ期肛门癌患者，并在治疗五周后以及后续的3个月、6个月、9个月和12个月等多个时间点采集ctDNA样本，以检测HPV ctDNA。通过细致的观察分析，研究人员成功地将ctDNA的检测与疾病复发联系起来。
研究结果显示，在治疗结束后的5周、3个月、6个月和12个月收集样本时，他们发现约22%的复发在5周时出现，3个月时观察到13%，6个月时观察到10%，而12个月时并未出现复发。特别值得注意的是，治疗后3个月检测到的ctDNA与患者的复发率存在显著关联。此外，研究还综合考量了基线分期、T分期、最终分期、年龄等预后因素。
这项研究的临床意义在于，它支持了将ctDNA分析与常规治疗后监测相结合的潜力。这不仅有助于我们识别出复发风险较高的患者，还能为这些患者提供无药物试验背景下的“辅助治疗”建议，甚至更为密切的监测。当然，这项创新性的研究仍需进一步验证。我们也需要更深入地了解所使用的技术平台，以应对该领域的快速发展。我坚信，这一研究概念极具潜力，将为我们识别高风险患者提供有力支持。
参考资料[1]https://meetings.asco.org/abstracts-presentations/234204[2]https://dailynews.ascopubs.org/do/podcast-exploring-car-t-cells-gi-cancers-asco24